Nhà / Sản phẩm / Ứng dụng protein / Hỗ trợ Proteomics / Dịch vụ kính hiển vi điện tử lạnh

Dịch vụ kính hiển vi điện tử lạnh

Kính hiển vi điện tử đông lạnh (cryo-EM) là một kỹ thuật tiên tiến trong sinh học cấu trúc cho phép các nhà khoa học hình dung các chi tiết chính xác của các đại phân tử sinh học. Cryo-EM dựa trên kính hiển vi điện tử truyền qua ở độ phân giải gần nguyên tử. Nhu cầu thị trường ngày càng tăng trong nhiều ứng dụng y sinh, ví dụ như phát triển thuốc, kháng thể, vắc-xin, v.v.

Nhận báo giá miễn phí

Giá trị Cryo-EM Giải pháp kết cấu Quy trình làm việc một cửa Nền tảng đáng tin cậy Tại sao chọn chúng tôi

Ưu điểm của cryo-EM so với tinh thể học tia X

Mặc dù nhiễu xạ tia X vẫn có thể đạt độ phân giải cao hơn một chút, cryo-EM thể hiện những ưu điểm đáng kể:

Số lượng mẫu tối thiểu là cần thiết.
Không cần kết tinh.
Không cần nguồn tia X synchrotron.
Bảo tồn nhà nước gần bản địa.
Đánh giá tính linh hoạt.
Thích hợp cho các hạt khó kết tinh như protein màng hoặc cụm siêu phân tử (ví dụ: vi rút).
Sự không đồng nhất của các cấu trúc có thể được giải quyết trong một mẫu duy nhất.
Mức độ tinh khiết thấp được chấp nhận.

Tăng trưởng theo cấp số nhân của số lượng mục nhập trong EMDB:

Giải pháp kết cấu

Đánh giá sự phù hợp của mẫu - Vết bẩn âm tính

Trước khi cam kết các nguồn kính hiển vi quan trọng trong cryo-EM, kiểm tra vết bẩn âm tính thường được thực hiện ở nhiệt độ phòng và điện áp thấptage. Bước này cho phép đánh giá sự phù hợp của mẫu, bao gồm tính đồng nhất, tổng hợp, hình thái hạt, kích thước và phân bố, sử dụng chất nhuộm mật độ electron cao.

Nhuộm âm đóng vai trò là một bước kiểm soát chất lượng quan trọng để đánh giá xem mẫu có phù hợp để thu thập dữ liệu cryo-EM hạ nguồn hay không.

Xác định cấu trúc độ phân giải cao – Phân tích hạt đơn (SPA)

Thu thập dữ liệu Cryo-EM thường tạo ra khoảng 10⁴ đến 10⁶ hình chiếu hai chiều riêng lẻ của các hạt được chụp ở các hướng khác nhau. Các phép chiếu này được căn chỉnh tính toán và phân loại thông qua quy trình xử lý hình ảnh để tái tạo bản đồ mật độ ba chiều ở độ phân giải dưới nano hoặc gần nguyên tử.

Một mô hình nguyên tử sau đó được xây dựng, tinh chỉnh và xác nhận trong bản đồ mật độ được tái tạo, cung cấp thông tin chi tiết về cấu trúc về các cơ chế chức năng của đại phân tử sinh học quan tâm.

Phân tích cấu trúc tại chỗ - Chụp cắt lớp điện tử lạnh (Cryo-ET)

Chụp cắt lớp điện tử lạnh cho phép hình dung ba chiều các cấu trúc sinh học trong bối cảnh tế bào hoặc virus tự nhiên của chúng. Cách tiếp cận này đặc biệt thích hợp để nghiên cứu các cụm đại phân tử lớn, phức hợp liên quan đến màng và cơ chế lây nhiễm vi-rút, cung cấp thông tin không gian và tổ chức không thể truy cập được bằng phương pháp đơn hạt.

Quy trình dịch vụ

Tư vấn dự án → ký kết NDA → xác nhận thỏa thuận dịch vụ → nhận mẫu → kiểm tra chất lượng → sàng lọc vết bẩn âm tính → thu thập dữ liệu cryo-EM → xử lý dữ liệu → gửi báo cáo.

Dữ liệu và kết quả

Tính khả dụng của dữ liệu đầy đủ được cung cấp trong suốt vòng đời dự án. Các vật liệu được phân phối bao gồm phim cryo-EM thô với các tệp tham chiếu khuếch đại, tệp dữ liệu trung gian ở các giai đoạn xử lý dữ liệu khác nhau, bản đồ mật độ ba chiều cuối cùng với các chỉ số chất lượng và độ phân giải, mô hình tọa độ nguyên tử nếu có và các báo cáo xác thực chéo như đánh giá MolProbity.

Tất cả dữ liệu có thể được phân phối thông qua các thiết bị lưu trữ di động hoặc các nền tảng dựa trên đám mây an toàn.

Ba thiết bị chính

Các dịch vụ cryo-EM của chúng tôi được hỗ trợ bởi quyền truy cập vào các nền tảng nghiên cứu khoa học cao cấp được trang bị thiết bị hiện đại.

Các hệ thống có sẵn bao gồm Talos L120C G2, một nền tảng sàng lọc cryo-EM và kính hiển vi điện tử truyền qua cấp nhập cảnh; Sông băng 2, một hệ thống cryo-EM 200 kV được tối ưu hóa cho quy trình chụp cắt lớp và hạt đơn thông thường; và Titan Krios G4, một nền tảng cryo-EM 300 kV hàng đầu được thiết kế để có khả năng ổn định, tự động hóa, thông lượng và độ phân giải tối đa.

Các nền tảng này hỗ trợ chung sàng lọc lưới lạnh, phân tích đơn hạt, chụp cắt lớp điện tử lạnh và phát triển phương pháp tiên tiến trên một loạt các ứng dụng sinh học cấu trúc.

Tại sao lại là Longlight?

Chúng tôi cung cấp kinh nghiệm quý báu và trưởng thành về kính hiển vi điện tử lạnh thông qua quyền truy cập vào các nền tảng nghiên cứu khoa học cao cấp và hợp tác với các chuyên gia trong ngành và cố vấn khoa học học thuật. Các dịch vụ của chúng tôi nhấn mạnh tính minh bạch và đầy đủ của việc phân phối dữ liệu, bao gồm dữ liệu thô, tệp xử lý trung gian, bản đồ mật độ cuối cùng, mô hình nguyên tử và báo cáo xác thực.

Bằng cách kết hợp thiết bị đo lường tiên tiến, quy trình xử lý dữ liệu có kinh nghiệm và thời gian giao hàng cân bằng, chúng tôi cung cấp các giải pháp cấu trúc cryo-EM chất lượng cao, đáng tin cậy phù hợp với nhu cầu nghiên cứu đa dạng.

Những câu hỏi thường gặp.

Q1: Khách hàng cần chuẩn bị bao nhiêu mẫu?

Vết ố tiêu cực:

nồng độ tối thiểu ~ 1 g / L

thể tích tối thiểu ~ 100 μL.

SPA với protein hòa tan:

nồng độ tối thiểu ~ 1 g / L

thể tích tối thiểu ~ 100μL.

SPA với protein màng:

nồng độ tối thiểu ~ 1 g / L

thể tích tối thiểu ~ 100μL.

để được thảo luận và điều chỉnh nếu cần thiết

Q2: Các yêu cầu đối với bộ đệm mẫu là gì?

Phạm vi pH: 6.0-8.5
nồng độ muối <200 mM
Glycerol thấp (bao nhiêu? doi: 10.1107/S2053230X24002553)
azide thấp (bao nhiêu? thiếu tài liệu tham khảo hỗ trợ)

Q3: Quy trình dịch vụ điển hình là gì?

Tư vấn dự án → NDA ký kết → thỏa thuận dịch vụ xác nhận → nhận mẫu → kiểm tra chất lượng → vết ố tiêu cực → thu thập dữ liệu → xử lý dữ liệu → gửi báo cáo.

Q4: Thời gian giao hàng trung bình là bao nhiêu?

Nhuộm âm tính: 1-2 tuần.
SPA, kết quả sơ bộ: 6-8 tuần.
SPA, mô hình độ phân giải cao: 2-3 tháng.

ChIP-seq

ChIP nghiên cứu sự tương tác giữa DNA và protein, và ChIP-seq được kết hợp với giải trình tự thế hệ tiếp theo để phát hiện các vị trí DNA trong bộ gen liên kết với các yếu tố phiên mã / histone cụ thể, được sử dụng để nghiên cứu sự tương tác giữa protein và nhiễm sắc.

Bộ gen

Longlight đã tập trung vào chẩn đoán phân tử và sinh học phân tử, chúng tôi đã tung ra một số dụng cụ liên quan đến NGS và vật tư tiêu hao thuốc thử, chủ yếu là Máy siêu âm tập trung, cam kết thúc đẩy sự phát triển của bộ gen, để phục vụ tốt hơn cho sự nghiệp y tế của con người.

Vật tư tiêu hao và bộ dụng cụ

Longlight cung cấp các loại gel agarose đúc sẵn, chất nhặt rác axit nucleic, ống Qubit, bộ chiết xuất axit nucleic và bộ dụng cụ chuẩn bị thư viện. Trong khi đó, tất cả các sản phẩm này có thể được sử dụng rộng rãi trong nghiên cứu khoa học cơ bản, dược phẩm sinh học và các kịch bản ứng dụng khác.