Làm thế nào sinh học phân tử chạy đệm tăng tốc độ điện di gel

Sinh học phân tử Running Buffer nghe có vẻ như là một chi tiết nhỏ trong phòng thí nghiệm, nhưng nó lặng lẽ kiểm soát tốc độ và độ rõ ràng của các dải DNA của bạn xuất hiện trên gel. Nó là một chất đệm có công thức đặc biệt được sử dụng để điều chế và chạy gel agarose, giữ cho DNA ổn định trong khi điện trường tách các mảnh theo kích thước. Bạn thấy nó hàng ngày trong kiểm tra sản phẩm PCR, xác minh plasmid, quy trình nhân bản và QC mẫu để giải trình tự. Nó cũng hỗ trợ các lĩnh vực nghiên cứu lớn như giải trình tự toàn bộ bộ gen, các dự án chỉnh sửa gen như CRISPR, thiết kế sinh học tổng hợp và thậm chí cả sàng lọc khám phá thuốc. Nhiều nghiên cứu cổ điển và có tác động cao phụ thuộc vào gel agarose sạch được cung cấp bởi một hệ thống đệm đáng tin cậy. Tuy nhiên, hầu hết mọi người vẫn sử dụng nó theo cách mặc định và chấp nhận chạy chậm như bình thường. Vậy làm thế nào một bộ đệm chạy sinh học phân tử có thể thực sự tăng tốc độ điện di gel mà không làm giảm chất lượng dữ liệu?

(Kiểm tra chất lượng giải trình tự trực tiếp PCR: Shimadzu (Deutschland))

Tại sao tốc độ điện di gel lại quan trọng tôin Phòng thí nghiệm hiện đại

Trong hầu hết các phòng thí nghiệm sinh học phân tử, gel agarose vẫn là một nút thắt cổ chai hàng ngày. Việc kiểm tra "nhanh" các sản phẩm PCR hoặc plasmid có thể dễ dàng mất 30 phút hoặc hơn từ khi nạp đến khi chụp ảnh. Khi bạn nhân con số đó trên hàng chục mẫu, nhiều lần chạy và khắc phục sự cố lặp đi lặp lại, thời gian gel lặng lẽ ăn cả ngày.

Đối với các nhóm thông lượng cao trong giải trình tự, chỉnh sửa gen hoặc sàng lọc thuốc, sự chậm trễ này thậm chí còn đau đớn hơn. Các kỹ thuật viên đợi gel trước khi họ có thể chuyển sang chuẩn bị thư viện. Các nhà nghiên cứu chờ đợi các dải xác nhận trước khi bắt đầu thí nghiệm tiếp theo. Các thiết bị không hoạt động trong khi DNA vẫn đang bò qua agarose dưới điện áp thấp để tránh quá nóng.

Đây là nơi Bộ đệm chạy sinh học phân tử được thiết kế có mục đích tạo ra sự khác biệt thực sự. Bằng cách giảm cường độ ion và kiểm soát sinh nhiệt, bộ đệm cho phép điện áp cao hơn nhiều mà không ảnh hưởng đến độ phân giải băng tần. Thay vì chia tay 30 phút, Bạn có thể hoàn thành các lần chạy trong khoảng 5 - 10 phút, giữ cho quy trình làm việc của bạn diễn ra theo tốc độ ý tưởng của bạn.

Đối với các phòng thí nghiệm bận rộn, tốc độ tăng đó không chỉ "cảm thấy" tốt hơn. Nó chuyển thành nhiều gel hơn mỗi ngày, nhiều cấu trúc được xác nhận hơn và quyết định dự án nhanh hơn - tất cả mà không cần mua hệ thống điện di mới.

Sinh học phân tử như thế nào Chạy bộ đệm Mang lại tốc độ chạy nhanh hơn

Tại Longlight Technology, chúng tôi đã phát triển một bộ đệm chạy sinh học phân tử có độ bền ion thấp được cung cấp dưới dạng cô đặc 50X tiện lợi. Sau khi pha loãng đến 1X, nó đã sẵn sàng để sử dụng cho cả việc chuẩn bị gel và bộ đệm chạy, đơn giản hóa việc thiết lập của bạn và giữ cho các điều kiện nhất quán.

Công thức cường độ ion thấp cho điện áp cao

Bộ đệm TAE hoặc TBE truyền thống giới hạn lượng điện áp bạn có thể áp dụng trước khi nhiệt tích tụ và các dải bắt đầu nhòe. Dung dịch đệm của chúng tôi được thiết kế để giảm thiểu sinh nhiệt để bạn có thể chạy gel một cách an toàn ở khoảng 25 - 30 V / cm chiều dài gel, nhanh hơn khoảng 2,5 - 3 lần so với điều kiện 1X TAE hoặc TBE thông thường.

Điều đó có nghĩa là một loại gel từng chạy trong nửa giờ giờ đây có thể được hoàn thành trong một lần nghỉ giải lao, thường chỉ trong 5 - 10 phút. Điều này đặc biệt có giá trị đối với:

✅Kiểm tra nhanh các sản phẩm PCR hoặc chèn nhân bản

✅Tấm sàng thông lượng cao, nơi nhiều mẫu phải được giải quyết nhanh chóng

✅Quy trình làm việc nhạy cảm với thời gian trong đó kết quả gel mở khóa các bước xuôi dòng

Bởi vì cùng một bộ đệm chạy sinh học phân tử được sử dụng cho cả đúc và chạy, bạn giảm sự thay đổi giữa các gel và tránh những bất ngờ gây ra bởi các lô đệm không khớp.

Làm sạch DNA cho quy trình làm việc hạ nguồn ngay lập tức

Tốc độ chỉ hữu ích nếu DNA bạn thu hồi có chất lượng cao. Bởi vì dung dịch đệm của chúng tôi không can thiệp vào quá trình chiết xuất hoặc thắt gel DNA, bạn có thể cắt bỏ các dải và di chuyển chúng thẳng vào các ứng dụng hạ lưu.

Trong thực tế, điều này có nghĩa là:

✅Phục hồi DNA cao từ các dải agarose đã cắt bỏ

✅Thắt và nhân bản không gặp sự cố mà không cần thêm các bước tinh chế

✅Đảm bảo rằng chạy nhanh hơn không gây hại cho tính toàn vẹn của DNA

Đối với các dự án giải trình tự, chỉnh sửa gen và sinh học tổng hợp, độ tin cậy này đảm bảo rằng tốc độ không bao giờ phải trả giá bằng chất lượng dữ liệu.

Hiệu suất ổn định và xử lý dễ dàng

Một bộ đệm điện di nhanh cũng phải thực tế. Công nghệ Longlight tạo ra Bộ đệm chạy sinh học phân tử này dưới dạng 50X ổn định có thể được pha loãng 1:50 với nước cất để tạo ra giải pháp hoạt động 1X. Dung dịch đệm 1X đã chuẩn bị có thể được giữ ở nhiệt độ phòng, với độ ổn định ít nhất 12 tháng trong điều kiện bảo quản được khuyến nghị.

Để duy trì hiệu suất trong nhiều lần chạy:

✅Sử dụng cùng một lô đệm 1X cho cả đúc và chạy gel

✅Tránh pha loãng dưới 1X, có thể gây ra sự di chuyển bất thường

✅Định kỳ thay bộ đệm đang chạy để giữ cho kết quả nhất quán

Trong quá trình chạy điện áp cao hoặc trong phòng ấm, nhiệt độ đệm tăng lên là điều bình thường. Thực hành phòng thí nghiệm tiêu chuẩn vẫn được áp dụng: theo dõi nhiệt, mặc áo khoác phòng thí nghiệm và găng tay dùng một lần để bảo vệ bản thân trong quá trình thiết lập và xử lý gel.

Nơi sinh học phân tử nhanh Chạy bộ đệm Phù hợp tôin Nghiên cứu của bạn

Bộ đệm chạy sinh học phân tử nhanh hơn, sạch hơn không chỉ là một sự tiện lợi; Nó hỗ trợ một loạt các ứng dụng đòi hỏi khắt khe. Các phòng thí nghiệm làm việc trong lĩnh vực phiên mã, điều hòa gen, giải trình tự toàn bộ bộ gen, giải trình tự lại, chỉnh sửa gen, sinh học tổng hợp hoặc xác nhận mục tiêu thuốc đều dựa vào kiểm tra DNA nhanh chóng, đáng tin cậy. Mỗi khi bạn xác nhận một cấu trúc, xác minh một bộ khuếch đại hoặc bản sao màn hình, thời gian gel sẽ xác định tốc độ bạn có thể tiến về phía trước.

Trong các dự án sinh học tế bào như nghiên cứu tăng sinh và apoptosis, gel nhanh giúp bạn xác nhận các cấu trúc, xác nhận sự hạ gục hoặc biểu hiện quá mức và kiểm tra các mảnh chính trong một buổi sáng thay vì kéo dài đến buổi chiều. Bộ đệm trở thành một chân ga yên tĩnh đằng sau mỗi làn đường bạn chạy.

Áp dụng Bộ đệm chạy sinh học phân tử hiệu suất cao cũng là một trong những nâng cấp dễ dàng nhất mà bạn có thể thực hiện. Không có thiết bị mới, không có đào tạo phức tạp và không thay đổi quy trình làm việc gel tiêu chuẩn của bạn:

Bạn pha loãng, đổ, tải và chạy - chỉ nhanh hơn. Nhuộm hoàn toàn tương thích với thuốc nhuộm DNA thông thường, cho dù bạn thêm chúng trực tiếp vào gel hay nhuộm sau khi điện di.

Tại Longlight Technology, mục tiêu của chúng tôi là giúp phòng thí nghiệm của bạn chuyển từ "chờ gel" sang "hành động dựa trên dữ liệu". Bằng cách kết hợp khả năng tách nhanh, khả năng đệm mạnh và phục hồi DNA đáng tin cậy, bộ đệm của chúng tôi được thiết kế để giữ cho quá trình điện di của bạn nhanh chóng và đáng tin cậy.

Liên hệ tHành động

Nếu nhóm của bạn sẵn sàng rút ngắn thời gian chạy gel từ 30 phút xuống còn khoảng 5 - 10 phút và tăng thông lượng mà không cần thay đổi dụng cụ, Công nghệ Longlight có thể giúp bạn. Hãy liên hệ với chúng tôi để yêu cầu mẫu hoặc tư vấn kỹ thuật và xem Bộ đệm chạy sinh học phân tử được tối ưu hóa có thể tăng tốc độ điện di gel của bạn từ thí nghiệm tiếp theo như thế nào.